高效液相色谱法测定正泰胶囊中20(R)-人参皂苷Rh2的含量

　　正泰胶囊是20(R)-人参皂苷Rh2粗品与人参多糖组成的复方制剂，临床用于癌症治疗和抗转移，本文采用高效液相色谱法测定其主要成分20(R)-人参皂苷Rh2的含量，获得满意结果。

　　仪器与试剂：LC-10AT高效液相色谱仪，CLASS-10A色谱工作站(日本岛津)。20(R)-人参皂苷Rh2对照品(长春东泰科技开发有限公司，高效液相色谱归一化法测定其含量为99.28%);正泰胶囊(长春东泰科技开发有限公司);所用试剂均为优级纯。

　　色谱条件：Techpshere 5ODS色谱柱(4.6mm×250 mm, 5μm); 流动相甲醇-水( 85:15) , 流速1.0 mL・min- 1, 检测波长203 nm, 柱温40 ℃ 。

　　方法与结果：

　　(1)供试溶液的制备：①对照品溶液：精密称取20(R)-人参皂苷Rh2对照品适量，加甲醇制成1ml含0.5mg的溶液。②样品溶液：精密称取本品内容物0.6g，精密加入甲醇25ml,称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，即得。

　　(2)线性关系考察 精密吸取对照品溶液2μl,4μl,6μl,8μl,10μl,注入液相色谱仪中，按上述色谱条件测定，以峰面积积分值为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线，回归方程为Y= 4744.5+355718X, r = 0.9999。线性范围1~5μg。

　　(3)精密度试验 精密吸取同一样品溶液10μl，连续进样5次，测得峰面积积分值的RSD为0.32%。

　　(4)重现性试验 去同一批号样品5份，依法平行测定5次，结果RSD为0.31%。

　　(5)回收率试验 精密称取同法测定已知含量的样品5份，精密加入20(R)-人参皂苷Rh2对照品适量，依法测定，计算回收率，结果平均回收率为99.58%。RSD为0.58%(n=5)。

　　(6)样品测定 依法测定样品3批，结果分别为1.98mg/粒， 2.05mg/粒，2.14mg/粒， (n=3)。

　　讨论：

　　(1)曾比较75%~90%的甲醇溶液作为流动相，结果表明，甲醇的浓度为85%时可获得较好的分离，且保留时间较短(10min)。而随行阴性对照液无干扰。

　　(2)本实验比较了超声提取时间10分钟，20分钟，25分钟，30分钟，结果超声时间25分钟后20(R)-人参皂苷Rh2的测得量不再增加，考虑超声震荡仪的功率及频率的差异，本法最后选择了30分钟为提取时间。