大黄ZHE虫丸鉴别方法

　　药物组成: 熟大黄300g，土鳖虫(炒)30g，水蛭(制)60g，虻虫(去翅足，炒)45g，济螬(炒)45g，干漆(煅)30g，桃仁120g，苦杏仁(炒)120g，黄芩60g，地黄300g，白芍120g，甘草90g。

　　性状: 本品为黑色的水蜜丸、小蜜丸或大蜜丸;气浓.味甘、微苦。

　　鉴别方法: (1)取本品，置显微镜下观察:草酸钙簇晶大，直径60-140μm。草酸钙簇晶直径18-32μm，存在于薄壁细胞中，常排列成行，或一个细胞中含数个簇晶。薄壁组织灰棕色至黑棕色，细胞多皱缩，内含棕色核状物。韧皮纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细。纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。体壁碎片黄色或棕红色，有圆形毛窝，直径8-24μm，可见长短不一的刚毛。体壁碎片金黄色或黄棕色，毛窝呈双圈状，有时表面可见疣状或针尖状突起。体壁碎片淡黄色，毛窝边缘为重叠圈状。

　　(2)取本品水蜜丸2.5g，研细;或取小蜜丸或大蜜丸6g，剪碎，加硅藻土3g，研匀，加乙醇40ml，超声处理30分钟，滤过，取1/2的滤液，蒸干，残渣加水10ml使溶解，加盐酸1ml，置水浴中加热水解30分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取2次，每次15ml，合并乙醚液，挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材50mg，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各1-2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚(30-60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏。供试品色谱中，在与对服药材色谱相应的位置上，显相同的橙红色斑点。 (3)取〔鉴别〕

　　(3)项下的剩余滤液，蒸干，残渣加水40ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次20ml。正丁醇液回收溶剂至干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄羊苷对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液制备的硅胶G薄层板上，使成条状，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5:3:1:1)为展开利，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的条斑。

　　(4)取本品水蜜丸1.2g，研细;或取小蜜丸或大蜜丸3g，剪碎，加硅藻土3g，研匀，加稀乙醇80ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水和乙醚各30ml使溶解，移至分液漏斗中，静置分层，奔去乙醚液，水液再用乙醚提取3次，每次30ml，弃去乙醚液，水液加水饱和的正丁醇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，回收溶剂至干。残渣加水5ml使溶解，通过D101型大孔吸附树脂柱(内径1cm，柱高12cm)，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加丙酮1ml使溶解，取上清液作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液(8:1:4:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。