人参皂苷Rh2致乳腺癌细胞凋亡和逆转的实验研究

　　肿瘤不仅是细胞增殖和分化异常的疾病，也是细胞凋亡异常的疾病，细胞凋亡与肿瘤发生、发展及其对治疗因子的反应关系密切。恶性肿瘤对化疗药物的多药耐药是当今肿瘤化疗失败的主要原因。近年来，人们逐渐认识到促进肿瘤细胞的凋亡是恶性肿瘤治疗的新目标。中药治疗肿瘤不仅毒副作用小，而且作用途径比较广泛。人参作为中国传统中药史上占有重要的地位，有大补元气,补气益肺,安神益智的功效,被用于多种古方验方的主药.人参为五加科多年生草本植物,其成分具有诸多生物活性成分,人参皂苷rh2是从红参中提取的天然活性成分,分子式为C36H6200HZO,分子量622,化学名为20(S)一原人参二醇-3-氧-B-D-吡喃葡萄糖苷,简称Rh2,毒性低,属于小分子物质且为脂溶性,容易通过血脑屏障.

　　克服肿瘤细胞的耐药,提高化疗的疗效,是进一步提高肿瘤治愈率的努力方向和优势所在。而MDRI基因过度表达产生的P一gp是多药耐药性产生的最重要原因。肿瘤细胞的多药耐药性(Multidrugresistanee,MDR)是指肿瘤细胞接触一种抗癌药物产生耐药的同时,对其它结构和作用机理不同的抗癌药物亦产生交叉耐药。MDR的原因是复杂的,但MDRI基因过度表达产生的p一糖蛋白(permeabilityglyeoprotein,p一gp)是产生的最重要原因。MCF一7/ADM细胞具有典型的MDR现象,其产生MDR的机制主要为MDRI基因过度表达,导致P一gP过度表达,从而使细胞内药物浓度减少。国外实验以人乳腺癌细胞系MCF一7为受试对象,研究Rh:对肿瘤细胞生长的抑制作用,并研究Rh2在逆转MDR方面的作用及其机理,在实验中证实,MCF-7/ADM细胞中存在P一gp耐药途径,而人参皂苷rh2对P一gP功能有抑制作用。因此Rh2可能抑制了P一gp对Caspase依赖的凋亡途径的保护作用,从而诱导了MCF-7/ADM细胞的凋亡。p一gp属于ABC(ATp一bindingCassette)转运蛋白家族的一员,是一种能量依赖性药物转出泵,能将化疗药物从癌细胞内泵出细胞外,从而使药物在细胞内积蓄浓度降低,药物的细胞毒作用降低,导致肿瘤化疗的失败。体外实验中,人参皂贰Rh2可以有效逆转P一gp介导的MCF一7/ADM的耐药性,是一种安全、高效的MDR逆转剂,可能成为具有广阔前景的抗肿瘤药物。

　　rh2对两种细胞周期的影响也有所不同，rh2使MCF一7细胞周期阻滞于S期,GZ/M期细胞减少;而在MCF一7/ADM细胞中,变化却相反,RhZ导致S期细胞减少,GZ/M期细胞增多。Rh2主要通过导致MCF一7细胞坏死而抑制其增殖;而对于MCF一7从DM细胞,则主要是通过Caspases途径诱导其凋亡，诱导耐药细胞系MCF一7/ADM凋亡的研究结果显示其在抗肿瘤作用方面的独特性。现国内外大量研究已证实，大量研究表明人参皂苷rh2可以从诱导细胞调亡、诱导细胞分化、抑制肿瘤DNA合成、提高机体免疫功能等各方面发挥抗肿瘤作用。人参皂苷Rh2可以抑制多种肿瘤细胞的增殖和生长，其抗肿瘤作用主要是通过以下机制实现的：

　　1、抑制肿瘤细胞DNA合成：人参皂苷rh2作用于细胞后对DNA合成复制有抑制作用，强度随药物浓度的增高而增强。

　　2、诱导肿瘤细胞的凋亡和分化：人参皂苷Rh2诱导肿瘤细胞凋亡是其抗肿瘤作用机制的重要方面之一。超微结构和DNA凝胶电泳都发现了人参皂苷rh2诱导C6胶质瘤细胞凋亡所致的形态学与生化改变,用电镜观察到典型的细胞凋亡特征，且该作用存在时间与剂量依赖性，随作用时间延长和药物浓度增高。凋亡细胞的比例明显增加。韩国Hyun一Euikim等利用小鼠胶质瘤细胞株观察研究人参皂苷Rh2，对脑瘤的潜在作用时发现，rh2可以通过引起细胞形态的改变、DNA断裂、casPe(凋亡活化基因)的激活和活性氧系列(Ros)的产生导致胶质瘤细胞的凋亡，诱导分化是恶性肿瘤细胞在体外分化诱导剂的作用下，分化向正常方向逆转的现象。

　　充分利用中医扶正培本的理论，发挥中药在抗肿瘤研究中的作用,克服肿瘤细胞的耐药,提高化疗的疗效,可帮助进一步提高肿瘤治愈率的努力方向和优势。