人乙酰胆碱酯酶基因转染增强全反式维甲酸诱导胰腺癌细胞凋亡
导读:人乙酰胆碱酯酶基因转染增强全反式维甲酸诱导胰腺癌细胞凋亡。可见胰腺癌细胞AChE基因的高表达可增加细胞对ATRA诱导凋亡的敏感性。
为了探讨转染人乙酰胆碱酯酶(AChE)基因对全反式维甲酸诱导胰腺癌细胞凋亡的影响,研究者应用含人AChE基因的真核表达质粒pcDNA3/AChE和绿色荧光蛋白(GFP)真核表达质粒pcDNA3/GFP。
以脂质体介导上述两种质粒DNA对人胰腺癌细胞株Patu 8988进行瞬时转染,转染后的细胞经全反式维甲酸(ATRA,1μmol/L)分别处理24 h及48 h,流式细胞仪分别检测A exin V染色后早期细胞凋亡率及转染效率,以细胞化学染色法(Karnovsky-Roots染色)检测AChE表达。
结果流式细胞仪测定GFP显示转染效率达(45.50±3.84)%,人AChE基因转染后联合ATRA治疗凋亡比例增加,转染前后分别为(14.26±1.16)%/(42.84±7.21)%和(18.08±0.75)%/(56.29±2.54)%。
细胞化学染色法可见AChE阳性细胞,染色聚集于胞核部位。可见胰腺癌细胞AChE基因的高表达可增加细胞对ATRA诱导凋亡的敏感性。
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